Токсоплазмоз кошек 2013

Качайте бесплатно!


ТОКСОПЛАЗМОЗ КОШЕК

К тканевым цистообразующим эймериидным кокцидиям относятся роды: Cystoisospora, Toxoplasma, Besnoitia, Hammondia, Sarcocystis, Frenkelia, Neospora.
Кокцидийная приода и гетероксенность жизненных циклов перечисленных выше родов была установлена лишь в 70-х годах ХХ века. Оказалось, что цисты, известные под родовыми названиями Toxoplasma, Besnoitia, Sarcocystis, Frenkelia представляют собой тканевые стадии развития кокцидий, паразитирующих в кишечной стенке различных плотоядных млекопитающих, хищных птиц, рептилий. Цисты, как правило, формируются в тканях промежуточных хозяев (травоядные, всеядные, грызуны, птицы и др.) Поедание тканей с цистами этих возбудителей соответствующими дефинитивными хозяевами ведет к половому развитию паразита в кишечной стенке с последующим формированием ооцист.
В жизненных циклах этих организмов (как и у классических кокцидий родов Eimeria и Isospora) обязательна триада Sporozoa , включающая бесполое размножение- мерогонию, происходящую по типу шизогонии, эндодио- и эндополигении, половой процесс (гаметогенез) и спорогонию. Гаметогенез осуществяется по типу оогамии с раздельным развитием гамонтов. У всех у них в основном сходная ультраструктура гомологичных бесполых и половых стадий жизненного цикла и, что следует особо отметить, изоспороидная структура ооцист. Последние не имеют микропиле, остаточного тела, а спороцисты без штидевского и субштидевского телец, но с остаточным телом; механизм эксцистирования у них аналогичен. После споруляции в ооцисте цистообразующих кокцидий формируются две спороцисты с четырьмя спорозоитами в каждой.
К настоящему времени у собак и кошек выявлено более 40 видов кокцидиид, относящихся к родам Cystoisospora, Toxoplasma, Hammondia, Besnoitia, Sarcocystis и Neospora и имеющих изоспороидную структуру ооцист (до 1970 года у кошек, собак и человека было известно всего 7 видов кокцидий рода Isospora). По структуре ооцисты идентификация кокцидий возможна далеко не всегда. Например, ооцисты Toxoplasma gondii и Hammondia hammondi, выделяемые кошкой, морфологически и по размерам идентичны; ооцисты и спороцисты Sarcocystis cruzi от крупного рогатого скота, S. tenella, S.orieticanis от овцы и S.equicanis , выделяемые собакой, также идентичны морфологически и по величине. А если учесть, что собака может выделять с фекалиями более 20 видов спороцист Sarcocystis , а кошка более 10) от домашних и диких животных, то самым надежным критерием идентификации видов у Sarcocystis оказывается характер жизненного цикла, выявляемый при экспериментальном заражении, что позволяет выявить как дефинитивных, так и промежуточных хозяев, а также оценить патогенность исследуемого вида по отношению к определенному хозяину (И.И. Вершинин, 1998).
Учитывая вышеизложенное, для идентификации цистообразующих кокцидий до рода и вида нужно обязательно знать особенности жизненного цикла паразита, органотканевую и хозяинную специфичность, патогенность возбудителя и характер вызываемой патологии, симптоматику, с учетом результатов иммунологической, биологической (заражение восприимчивых животных) диагностики. Также анализируют эпизоотологические данные. Определенное значение имеет локализация паразита.
В цистной фазе у Sarcocystis выражена локализация в мышечной ткани, у Besnoitia – в соединительной, у Frenkelia- в нервной, у Cystoisospora – в лимфатических узлах и различных внутренних органах, у Hammondia- в мышечной, у Toxoplasma- в нервной, мышечной и паренхиматозных органах.
Следует иметь в виду также, что одно и то же животное может быть заражено не сколькими видами цистообразующих кокцидий.
Исследование ооцист

Морфологию незрелых ооцист можно исследовать в нативном мазке и раздавленной капле из фекалий больного животного и в содержимом копрокультур. В этих случаях исследуемый материал разбавляют физиологическим раствором. Ооцисты очень устойчивы и могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких месяцев даже при наличии в фекалиях небольшого количества формалина, это дает возможность сохранять кокцидий в условиях лаборатории, а также пересылать для исследования в 10% растворе формалина.
При слабо выраженных инвазиях хорошо использовать метод насыщения предложенный Якимовым.
Небольшое количество свежих фекалий растирают в ступке в насыщенном растворе поваренной соли. Полученную смесь фильтруют через марлю в небольшую коническую колбочку или стаканчик для копрологических исследодваний и оставляют на 30-45 минут. За это время ооцисты кокцидий, как более легкие по удельному весу, всплывают на поверхность раствора и отсюда могут перенесены гельминтологической петлей на предметное стекло для исследования под микроскопом.
Качественный анализ
Метод Фюллеборна
Исследуемый материал в качестве 5 грамм помещают в ступку заливают насыщенным раствором поваренной соли и тщательно растирают до получения равномерной суспензии, затем фильтруют через металлическое сито или марлю, которые помещают в коническую колбу с узким горлом. Сосуд с суспензией до самого верха доливают насыщенным раствором поваренной соли и отстаивают. Через 35-40 минут поверхностную пленку снимают проволочной петлей, наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом (х 150).
Состав флотационного раствора Фюллеборна:
1) поваренная соль 350-400 грамм ;
2) вода дистиллированная 1000 миллилитров.
Поваренную соль растворяют в кипящей воде, кипятят 5 минут, затем охлаждают и фильтруют через ватно-марлевый фильтр.
Метод Дарлинга
В ступке суспензируют 3-5 грамм фекалий с 15-20 мл воды. Суспензию процеживают через металлическое сито в центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 2-5 мин при 2500 об/мин. Верхний слой сливают, к осадку добавляют жидкость Дарлинга, Осадок суспензируют и повторно центрифугируют 5 мин при1500-2000об/мин поверхностную пленку снимают проволочной петлей, наносят на предметное стекло, закрывают покровным стеклом и микроскопируют.
Жидкость Дарлинга: смешивают равные количества насыщенного раствора поваренной соли и глицерина.
Флотация в растворе сахара
Использование для флотации растворов сахаров имеет ряд преимуществ перед методами флотации с использованием гипертонических растворов поваренной соли. Растворы сахаров не оказывают разрушающего действия на оболочки ооцист, что очень важно при исследовании групп кокцидий. Кроме того, растворы сахаров не кристаллизуются при длительной микроскопии.
Исследуемый материал в количестве 3-5 грамм смешивают с 15-20 мл воды, затем суспенцию центрифугируют в течение 3-5 мин при 2500 об/мин, надосадочную жидкость сливают и к осадку доливают раствор сахара до верхней части центрифужной пробирки. Осадок ресуспензируют стеклянной палочкой в растворе сахара и повторно центрифугируют в течение 3-5 мин при 1500-2000 об/мин. Ооцисты и цисты концентрируются на поверхности пленки центрифугата, с которой их снимают петлей, наносят на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют под микроскопом.
Раствор сахара:
1) сахароза 50 грамм;
2) вода дистиллированная 320 мл;
3) фенол кристаллический 6,5 грамм.
Количественный анализ
Для определения интенсивности инвазии производят подсчет обнаруженных ооцист в 1г фекалий по следующим методам:
1. Метод Столла
В цилиндрический сосуд или колбу наливают 56 мл децинормального раствора NaOH, затем добавляют 4 мл исследуемого материала (общий объем жидкости составляет 60 мл). Содержимое тщательно перемешивают стеклянной палочкой, помещают в сосуд десять стеклянных бусинок и, плотно закрыв сосуд, встряхивают в течение минуты. Затем быстро, чтобы суспензия не отстаивалась, набирают в градуированную пипетку 0,075 мл суспензии, содержащей 0,005 миллилитра исследуемого материала, затем наносят на предметное стекло, накрывают покровным и подсчитывают под микроскопом число ооцист. Для определения числа ооцист в 1 грамме исследуемого материала, необходимо подсчитанное количество ооцист помножить на 200.
2. Метод рекомендованный комитетом ВОЗ в 1968 году.
Во флакон (10мл) с притертой пробкой наливают 4 мл воды (первая отметка по верхнему мениску), затем добавляют еще 1 мл воды (вторая отметка по верхнему мениску). Воду сливают во флакон и добавляют 10%-ный раствор формалина до первой отметки, затем вносят фекалии с таким расчетом, чтобы уровень жидкости во флаконе поднялся до второй отметки. Закрыв флакон пробкой, содержимое встряхивают до получения равномерной суспензии, после чего во флакон до верха доливают 10%-ный раствор формалина и перемешивают. Для исследования берут каплю содержимого флакона, наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и под микроскопом (х150) подсчитывают количество ооцист. Подсчет осуществляют в два -три приема(при этом каждый раз материал наносят заново). Средний арифметический показатель количественного содержания ооцист (в 5 мг) необходимо помножить на 200, что соответствует содержанию ооцист в одном грамме фекалий.
Стандартизация флотационного метода
Этиология заболевания
Токсоплазмоз (Toxoplasmosis) – природноочаговая антропозоонозная болезнь, вызываемая простейшим внутриклеточным паразитом Toxoplasma gondii (Nicolle et Manceaux, 1909). У кошек протекает обычно хронически, бессимптомно, у промежуточных хозяев- часто остро и характеризуется комплексом нервных явлений, а также патологией беременности и родов.
Возбудитель тоскоплазмоза был впервые обнаружен французскими учеными микробиологами Николем и Мансо в 1908 г. у североафриканского грызуна гунди. В дальнейшем токсоплазмы были выделены и от других видов животных, птиц, рептилий во всех частях света. В 1939 году Сэбин выявил морфологическую и иммунологическую идентичность штаммов токсоплазм, полученных от различных видов животных и человека. В России токсоплазмоз у собак впервые описан В. Л. Якимовым и Н. Коль-Якимовой (1911). Работы Мелло (1910) и Карини (1911) по описанию токсоплазмоза у собак послужили основанием для изучения этого заболевания у домашних животных.
Широкое и планомерное изучение токсоплазмоза в нашей стране началось после 1955 года, когда при Институте эпидемиологии и микробиологии им. Гаммалеи и при институте зоологии АН Казахской ССР были созданы специализированные лаборатории.
Токсоплазмоз (Toxoplasmosis) – природноочаговая антропозоонозная болезнь, вызываемая простейшим внутриклеточным паразитом Toxoplasma gondii (Nicolle et Manceaux, 1909). У основных хозяев, кошек, протекает обычно хронически, бессимптомно, у промежуточных хозяев- иногда остро и характеризуется комплексом нервных явлений, а также патологией беременности и родов.


Вопросами этиологии токсоплазмоза посвящены многие исследования. Детальные описания токсоплазм можно найти в книге «Жизненный цикл токсоплазм» (Алма-Ата, 1974, ред. Галузо И. Г.), в работах Д. Н. Засухина, Д. К. Иира (1973), Д. Н. Засухина (1973, 1974), Г.Т. Акиншиной и Д. Н. Засухина (1980), М. А. Савиной и Д. Н. Засухина (1980), Л. И. Грачевой (1980), J. Dubey, J. Frenkel (1972).
Мы остановимся лишь на основных свойствах возбудителя токсоплазмоза, знания, которых необходимо практическому врачу для понимания вопросов патогенеза, лабораторной диагностики, лечения и профилактики этого заболевания.
Вскоре после открытия токсоплазмоза было доказано, что возбудитель этой болезни принадлежит к типу простейших и, как недавно установлено, относится к классу споровиков, отряду Coccidiomorpha.
В связи с неясностью систематического положения токсоплазм, не изученностью некоторых деталей их развития у некоторых исследователей возникли разногласия в терминологии, определяющей различные стадии развития паразита. Это в какой-то мере связано с тем, что жизненный цикл развития токсоплазм был уточнен лишь в 1970 г.
По своей форме трофозоиты токсоплазмы напоминают дольку апельсина или полумесяц. Они изогнуты, один конец их заострен, другой более округлый. На этой стадии они являются внутриклеточными паразитами, способными размножаться бесполым путем (шизогонией) в клетках различных тканей многих видов теплокровных животных. Раньше их называли пролиферативными формами или трофозоитами. Но C. Hoare (1972) предположил назвать их «эндозоитами», а J. Frenkel (1973) - «тахизоитами». При хроническом течении инфекции (что характерно для токсоплазма человека) паразиты образуют цисты, которые C. Hoare (1972) назвал «цистозоитами», а J. Frenkel (1973) – «брадизоитами». Эти стадии бесполого развития токсоплазм могут располагаться как внутриклеточно, так внеклеточно.
В настоящее время известны два типа размножения токсоплазм: 1) бесполое размножение, включающее эндодиогению, эндополигению и шизогонию; стадиями бесполого развития являются эндозоиты (расположенные вне- и внутриклеточно) и цистозоиты, или цисты; 2) половое размножение (гаметогония); стадиями полового развития являются макро- и микрогаметоциты, которые сливаясь образуют зиготы, которые в процессе спорогонии образуют ооцисты, содержащие по 2 спороцисты, в каждой из которых по 4 спорозоита.
Наличие полового размножения токсоплазм установлено лишь в 1970г. Половой цикл развития происходит в эпителии кишечника окончательного хозяина (домашняя кошка и некоторые другие представители семейства кошачьих). В связи с этим введены термины и для обозначения кишечно-эпителиальных стадий развития токсоплазм. К ним относятся мерозоиты, т. е. внутриклеточные и внеклеточные стадии, образующиеся в результате шизогонии. Половое размножение характеризуется появлением, гаметоцитов, затем мужских и женских гамет, в результате слияния которых образуется зигота, преобразующаяся затем в ооцисту. Инвазионные стадии, образующиеся в процессе спорогонии, формируются в ооцисте уже вне организма кошки, называются спорозоитами [Лысенко А. Я., 1980].
Многообразие стадий развития паразита и большое число синонимов для обозначения этих стадий нередко затрудняют восприятие данной литературы, посвященной описанию паразита. Следует различать псевдоцисты (скопление эндозоитов или пролиферативных форм, внутриклеточно), цисты (цистозоиты, цистные стадии) и ооцисты (покоящаяся стадия, возникшая в результате полового развития паразита в кишечнике окончательного хозяина).
В жизненном цикле токсоплазм И. Г. Галузо и соавт. (1974) выделяют 4 основных процесса: 1)пролиферацию, 2)шизогонию, 3)гаметогонию, 4)спорогонию. В организме человека и других промежуточных хозяев происходит лишь процесс пролиферации. Свойства пролиферативных форм паразита имеют большое значение для врачей – клиницистов. Представление о последующих стадиях развития токсоплазм, происходящих в организме окончательного хозяина, важно в основном для понимания некоторых сторон патогенеза и эпидемиологических аспектов проблемы токсоплазмоза.
При световой микроскопии эндозоиты внеклеточно представляют собой образование в виде полумесяца размерами 4 – 7*1,2 – 2 мкм, в котором при окраске по Романовскому – Гимза хорошо заметны красновато-фиолетовое ядро и голубоватая протоплазма. Внутриклеточно расположенные токсоплазмы несколько большего размера и округлой формы. Скопление токсоплазм в вакуолях клеток хозяина называются псевдоцистами, так как в отличие от цист они не имеют собственной оболочки. Псевдоцисты наблюдаются в отрой стадии инфекции. Пролиферативные формы паразита (эндозоиты) играют основную роль в патогенезе острой формы токсоплазмоза и имеют определенное значение при обострении хронического токсоплазмоза.
В настоящее время морфология эндозоитов (пролиферативные формы) хорошо изучена с помощью не только светового, но и электронного микроскопирования. Клетка токсоплазмы имеет довольно сложное строение. Установлено, что ее оболочка (пелликула) состоит из наружной, более плотной мембраны и двух внутренних тесно соприкасающихся мембран. На концах паразита внутренняя оболочка образует полярные кольца. Под внутренней оболочкой расположены подпелликулярные микротрубочки, хорошо заметны и более крупные образования – токсонемы (микронемы). Субпелликулярные микротрубочки начинаются у полярного кольца и доходят до ядра токсоплазмы, роль их недостаточно ясна; считается, что они участвуют в движении паразита и, следовательно, играют определенную роль в проникновении токсоплазмы в клетку хозяина [Акиншина Г. Т., Засухин Д. Н., 1980; Tryon J., 1979, и др.]
Характерной органеллой мерозоита токсоплазмы является коноид, расположенный на апикальном конце паразита. Он представляет собой усеченный конус, в котором находится лента шириной 23 нм в виде спирали из 8 – 9 витков. Размеры коноида могут изменяться. Предполагается, что коноид имеет значение для проникновения паразита в клетку. Специфический токсоплазмозный антиген обнаружен в пелликуле и коноиде [Tryon J.,1979]. Функциональная роль полярных колец пока не ясна, возможно, они принимают участие в движении паразита. Микронемы (токсонемы) выполняют секреторную и сократительную функции. Микропоры наружной оболочки токсоплазмы служат для поглощения питательного материала из клетки хозяина. Помимо этих специфических образований, токсоплазмы имеют также ядро с двойной мембраной, ядрышком, аппаратом Гольджи, митохондрии, рибосомы и другие органеллы. [Акиншина Г. Т., Засухин Д. Н., 1980].
При длительном течении процесса (а у человека и животных, выполняющих роль промежуточного хозяина токсоплазмоз всегда протекает длительно в латентных и манифестных формах) В их организме формируются тахизоиты, которые образуют псевдоцисты. Они округлые, диаметром от 50 до 200 мкм; количество паразитов в таком образовании может достигать нескольких тысяч в результате бесполого размножения тахизоитов в лейкоцитах. Характерной особенностью является наличие у них собственной оболочки (растянувшейся оболочки пораженного лейкоцита). Псевдоцисты локализуются преимущественно в головном мозге, глазах, мышцах, миокарде, в других же органах и тканях цисты образуются исключительно редко [Лысенко А. Я., 1980]. При окраске по Романовскому – Гимзе в цистах заметны, в основном, ядра токсоплазм или, как их называют по Frenkel (1973), брадизоитов. Паразиты как бы погружены в бесструктурную желатиновую субстанцию, внутренних перегородок псевдоцисты не имеют.
В патогенезе токсоплазмоза животных и человека особое значение имеет эта цистная стадия паразита. Именно псевдоцисты обуславливают многолетнее, а часто и пожизненного существование паразита в организме инфицированных животных и человека и развитие серьезных патологических процессов.
Инцистирование токсоплазм происходит спустя некоторое время после инфицирования теплокровного животного. Причины перехода токсоплазмы в цистные формы еще нее выяснены окончательно, но большинство исследователей связывают с размножением тахизоитов, в которые преобразуются проникшие в хозяина токсоплазмы. В то же время допускается, что в ходе инфекционного процесса на паразита все большее влияние оказывают факторы иммунитета и неспецифической резистентности макроорганизма. В эксперименте было показано в частности, что под влиянием иммунной сыворотки начинается процесс цистообразования [Shimada et al., 1974 и др.]. Правда, цисты могу образовываться и при отсутствии антител [Савина М. А., 1970; Jacobs J. еt al., 1965].
В организме экспериментальных животных переход в цистные формы происходит не одномоментно, у них одновременно можно наблюдать и пролиферативные формы (псевдоцисты), и формирование в них цистозоитов. Учитывая, что при заражении животных вводился один штамм токсоплазм и, следовательно, свойства паразита в разных тканях организма были одинаковыми, неодновременное инцистирование, возможно, связано с воздействием различных тканей и органов инфицированного животного.
Цисты начинают формироваться внутриклеточно в лейкоцитах, но в дальнейшем клетка может разрушиться и циста оказывается вне клетки. Образование цист начинается с формирования стенки. Морфологически циста характеризуется наличием плотной и сложной по строению оболочки, поверхность ее складчатая или бугристая, что способствует большему контакту с тканями хозяина.
Псевдоцисты не являются образованиями, в которых токсоплазмы «законсервированы» и постепенно отмирают. Неправомерно, как это было раньше, противопоставлять пролиферативные формы и цисты. Внутри цист также происходит размножение токсоплазм, хотя и не такое интенсивное, как эндозоитов (отсюда и название этой стадии – «брадизоиты» по Френкелю, то есть медленно размножающиеся). Кроме того, при определенных условиях оболочка цист может разрушаться, через образовавшуюся щель токсоплазмы выходят из цисты и проникают в клетки хозяина, где начинают размножаться. Рядом со старыми (зрелыми) цистами формируются новые цисты [Werner H., Pichl H., 1969]. Это способствует развитию рецидивов токсоплазмоза и у человека, и у животных.
Для понимания патогенеза и клинических особенностях токсоплазмоза важное значение имеет вопрос о длительности сохранения цист в тканях организма промежуточного хозяина. Токсоплазмы в цистах не только размножаются, часть паразитов может и отмирать. В старых крупных цистах удается обнаружить мертвые зоиты, которые не прокрашиваются в микропрепаратах [Janssen R. Et al., 1967; Remington J., 1962]. Однако их число невелико – всего 2 – 6 % [Zyper E. Et al., 1967]. Таким образом, жизнеспособные паразиты в цистах могут сохраняться в инфицированном организме неопределенно долгое время, а чаще пожизненно [Лысенко А. Я., 1980].
Устойчивость токсоплазм во внешней среде зависит от стадии жизненного цикла паразита. Эндозоиты (пролиферативные формы, трофозоиты)
являются внутриклеточными паразитами и очень быстро погибают вне организма. В выделениях больных они сохраняются всего несколько часов. Они погибают вне организма. Они погибают при замораживании, высушивании, нагревании, под влиянием ультрафиолетового облучения и даже под воздействием дистиллированной воды. В трупах погибших животных эндозоиты могут сохраняться до нескольких дней. Лишь при быстром замораживании материала, содержащего пролиферативные формы токсоплазм, до сверхнизких температур (температура жидкого азота) удалось длительно сохранять эти формы [Cognet J., Garrigue G., 1968] Эндозоиты быстро погибают также под влиянием различных антибиотиков и химиопрепаратов.
Цисты токсоплазм благодаря наличию оболочки сохраняются значительно дольше; например, в мясе при температуре +4 / +6 С - до 24 дней, а в ткани мозга при этой же температуре –свыше 2 мес. [Шевкунова Е. А., 1980]. Замораживание инфицированного мяса до –20С приводит к гибели цист [Лысенко А. Я., 1980]. Цисты устойчивы также к воздействию пищеварительных ферментов и к химиотерапевтическим препаратам, используемым при лечении больных токсоплазмозом. С этим связаны сложности лечения хронических форм токсоплазмоза и невозможность добиться полной «санации» организма от токсоплазм.
Наиболее устойчивой формой пребывания токсоплазм во внешней среде являются ооцисты, которые в почве, песке и др. могут сохранять жизнеспособность до года и более [Галузо И. Г., 1972, 1974; Шевчукова Е. А., 1980; Dubey J.et al., 1970; Frenkel J., 1974, 1975], что имеет большое значение в эпидемиологии токсоплазмоза.
Отдельные штаммы токсоплазм бывают различными по вирулентности, интенсивности размножения, инвазивности, резистентности к организмам различных видов хозяев и химиопрепаратам.
Наряду с высоковирулентными штаммами (например, штамм RH), часто выделяются маловирулентные и авирулентные, которые не приводят к развитию манифестных форм болезни у экспериментальных животных, тогда как заражение штаммом RH ведет к развитию у них смертельной токсоплазмозной инфекции. Даже внутри одного штамма отмечаются некоторые различия, и только метод выделения клонов в культуре тканей позволил получить чистые линии токсоплазм [Акиншина Г. Т., Засухин Г. Д., 1966, 1980 и др.]
Особое значение имеет изучение возможности появления пролиферативных форм токсоплазм, устойчивых к химиопрепаратам, используемых при лечении больных токсоплазмозом. Как показали исследования Акиншиной Г. Т и соавт. (1977), при пассажах свежевыделенных штаммов токсоплазм очень быстро (через 1 – 2 пассажа) удается получить устойчивые к хлоридину клоны, причем в дальнейшем их резистентность не нарастает. В данном случае, по мнению автора, происходит селекция клонов в пределах выделенного штамма. Другим путем возникновения резистентности может быть появление лекарственно-устойчивых вариететов токсоплазм. Во всяком случае, следует иметь в виду, что среди неоднородных популяций токсоплазм встречаются клоны, устойчивые к тем или иным лекарственным препаратам, что необходимо учитывать при проведении терапии.
Изучение антигенной структуры токсоплазм имеет важное практическое значение, в частности, для целей специфической лабораторной диагностики и проведения иммунотерапии. Изучение токсоплазмина, содержащего весь комплекс антигенов токсоплазм, проводилось с помощью иммуноэлектрофореза многими авторами. Была установлена антигенная неоднородность этого препарата. Этим методом удается установить наличие 2 – 5 фракций антигена. Исследование антигена, полученного из чистой культуры токсоплазм, обработанной ультразвуком с помощью дискового электрофореза, позволяет выделить наличие семи фракций. Постановка реакции преципитации с антисыворотками показала, что специфическую активность проявляет фракции, лежащие в зонах альбумина,  и глобулинов. Установлено также, что токсоплазменный антиген состоит из белковой и белково-полисахаридной фракции [Грачёва Л. И., 1973, 1980].
Культивирование токсоплазм проводится путем инфицирования животных (белых мышей, кроликов и др.) или в культурах тканей (культура куриных фибробластов, клетки почек свиньи, почек обезьян, СОЦ., Нер-2 и др.). Инвазия токсоплазмами приводит к временной стимуляции митотической активности клеток культуры ткани, вероятно связанной с повышением метаболизма в последних [Акиншиной Г. Т. и др. 1975, 1980]. Эти изменения наступают раньше, чем проявляется цитопатическое действие паразита. Токсоплазмы обладают тропизмом к различным тканям (мышечная, нервная и др.).
Широкое распространение токсоплазмоза, нередкие случаи рецидивов болезни у человека после перенесения других инфекционных заболеваний указывают на необходимость изучения токсоплазмоза в сочетании с другими инфекционными агентами. В клиническом аспекте этот вопрос изучен ещё не достаточно, поэтому важными представляются исследования, проведенные на культурах тканей и опытах на животных. Было установлено, что инфицированные токсоплазмами мыши становятся резистентными к листериям, сальмонеллам и некоторым вирусам (саркомы – 180, Менго и др.) при последующем заражении этими возбудителями. Резистентность выявляется как при острой, так и при хронической формах токсоплазмозной инфекции. Чем обусловлено повышение резистентности – остается невыясненным. Возможно, здесь определенную роль играет продукция интерферона, что было показано в опытах с острой токсоплазмозной инфекцией на мышах [Remington J. Et al., 1966, 1971, 1972].
Одновременное заражение культуры ткани вирусом цитомегалии и токсоплазмами приводило к повышению резистентности клеток хозяина к инфекции, а также к подавлению репродукции токсоплазм [Gelderman P. et al., 1967].
При исследованиях на культурах тканей [Акиншиной Г. Т. и др. 1970, 1980] удалось моделировать тройную смешанную инфекцию. Культура ткани инфицировалась токсоплазмами, вирусами осповакцины и везикулярного стоматита. Размножение токсоплазм в этих случаях снимало ингибирующее действие вируса везикулярного стоматита на размножение вируса осповакцины. Механизм этого явления пока не ясен.
Имеются данные, что сами токсоплазмы могут продуцировать интерфероноподобное вещество [Freshman M. Et al., 1966; Ryte M., Jones T., 1966; Remington J., Merigan MM., 1968]. С другой стороны, при токсоплазмозе может подавляться иммунный ответ, в частности при иммунизации инфицированных мышей бараньими эритроцитами [Strickland G. Et al., 1973]. Было также установлено, что токсоплазмозная инфекция в начале стимулирует продукцию Т- и В-лимфоцитов, затем наступает угнетение образования Т-клеток [Strickland G. Et al., 1973].
Таким образом, пока нет достаточно убедительных экспериментальных данных, раскрывающих механизмы взаимодействий возбудителей разной природы при смешанных инфекциях. Наряду с экспериментальными исследованиями представляется важным и необходимым изучение сочетанных инфекций у больных токсоплазмозом. При многолетней персистенции токсоплазм и большой инфицированности населения многие другие инфекционные заболевания нередко протекают на фоне токсоплазмоза (чаще латентного). Такое взаимодействие возбудителей в одном макроорганизме пока не изучено.
Эпидемиология
Распространение токсоплазмоза
При обследовании населения в различных странах мира с помощью серологических и аллергологических методов установлено, что инфицированность токсоплазмозом колеблется в широких пределах – от 6 до 90 %. В странах Африки, Центральной и Южной Америки она доходит до 90 %, а на территории бывшего СССР, по данным разных авторов, колеблется от 5 до 50 % [Шевкунова Е. А., 1980]. Особенно широко инфицировано население в тех странах, где принято употреблять блюда из недостаточно термически обработанного мяса (Австрия, Франция, ФРГ и др.). Сравнительно низкая зараженность населения в Азии- Афганистане, Вьетнаме, Индонезии.
Для региональной инфицированности играют роль: хозяйственный профиль района, особенности национальной кухни, уровень культуры и санитарное состояние. С возрастом инфицированность отдельных лиц повышается. В Москве инфицированность населения в 1997 г. составляла 26 % и такая же (20- 25 %) по Средней полосе России. Заболеваемость изучена недостаточно. Обязательная регистрация введена лишь в некоторых странах, в частности Германии, Чешской республике. Имеются данные о частоте врожденного токсоплазмоза. Так во Франции, Австрии, Германии на 1000 новорожденных приходится 1-8 детей с врожденным токсоплазмозом. В США ежегодно рождается около 3000 больных детей с токсоплазмозом.
Изучалась зависимость инфицированность от географических условий. Было показано, что в южных регионах она выше, чем на севере. Так, в Исландии инфицировано 4 – 11 % населения, а в Гондурасе и на Таити – 64 -68 % обследованных [Feldman H., Miller N., 1956]. Даже внутри одной страны может выявляться такая закономерность. Так, новобранцы во Франции инфицированы в среднем на 60.7 %, а те, что призванны из района Средиземного моря – 79.7 % [Cognet J., Garrigue G., 1968].
Позднее было установлено, что и жители Севера инфицированы также довольно экстенсивно; например, на Аляске инфицировано 28 % населения [Peterson D. et al., 1974].
На территории бывшего СССР не выявлено существенного различия инфицированности населения северных и южных областей [Скавинский Ю. В. и др., 1966; Шевкунова Е. А., 1971; Шевкунова Е. А., 1980]. По-видимому, природные условия (температура, влажность почвы, уровень инсоляции и пр.) могут оказывать влияние на длительность сохранения ооцист внешней среде, однако большое значение для инфицированности имеют такие факторы, как развитие животноводства, характер питания местного населения.
Повышенную инфицированность сельского населения по сравнению с городским, можно объяснить большим количеством кошек в сельских районах, большей возможностью инфицироваться ооцстами через загрязненную почву, а не только контактом людей с сельскохозяйственными и домашними животными, как это объяснялось раньше, до открытия полового цикла развития токсоплазм [Шевкунова Е. А., 1980].
Возрастание инфицированности с возрастом отмечали многие авторы. Так по данным Е. А. Шевкуновой (1980), лица в возрасте 16 – 19 лет инфицированы на 23 %, 20 – 29 летние на 21– 30 %, 30 – 39 летние– 35.3 %, у лиц 40 лет и старше инфицированность сохраняется на одном уровне- в пределах 44.7 – 46 %. В Гане у детей до 10 лет инфицированность была выявлена у 24 %, у лиц 11 – 20 лет – 50 %, 21 – 30 лет – в 80 % [Godwin I., Remington J., 1973]. В Греции дети до 10 лет были инфицированы в 13.8 %, а взрослые 31 – 35 лет – в 49.2 % [Moraitou M., Papapanayotou J., 1973]. При обследовании свыше 3000 человек с помощью внутрикожных аллергических проб и серологических реакций было обнаружено плавное нарастание инфицированности с возрастом. Дети до 10 лет оказались инфицированными в 15 % случаев, лица 11 – 20 лет – в 19.4 %, 21 –30 лет – в 24.6 %, 31 – 40 лет – в 26 %.
По данным многих авторов, женщины инфицируются чаще, чем мужчины; по нашим данным, и инфицированность женщин старше 20 лет была в 1.5 – 2 раза выше, чем мужчин. Вероятно, это связано с большим участием женщин в приготовлении пищи, контактом их с сырым мясом, дегустацией мясного фарша и т.п.
Во многих работах изучалась связь профессии с инфицированностью токсоплазмозом. Однако в большинстве исследований контактные группы были недостаточно репрезентативными. Не учитывались влияния на инфицированность отдельных лиц других факторов. Поэтому пока нет оснований для выделения каких-либо групп лиц с повышенным риском инфицирования, за исключением работников боен и мясокомбинатов. Например, инфицированность ветеринарных работников и доноров существенно не различается и равна соответственно 22 и 24 %, а работники боен инфицируются в два раза чаще [Swanepoel R. Et al., 1974]. По данным Е. А. Шевкуновой (1980), токсоплазмоз регистрируется у 67 % работников мясокомбинатов, тогда как в контрольной группе было всего 19.3 % инфицированных. При обследовании более 3000 человек не выявилено достоверной зависимости инфицированности токсоплазмозом от профессии обследуемых.
Заболеваемость
Если инфицированность населения можно выявить достаточно точно, то данные о заболеваемости токсоплазмозом (т. е. о частоте манифестных форм инфекции) получить значительно сложнее. Иногда это связывают с отсутствием обязательной регистрации больных токсоплазмозом. Но наличие его мало бы помогло в определении истинной заболеваемости. Дело в том, что практические врачи ещё недостаточно знакомы с клиникой токсоплазмоза и большинство больных, по нашим данным, впервые вступают под наблюдение инфекционистов лишь через 6 –10 лет от начала заболевания. С другой стороны, переоценка положительных результатов серологических исследований и аллергической пробы некоторыми врачами приводит к тому, что диагноз «токсоплазмоз» нередко ставится больным с заболеваниями иной этиологии.
По нашему мнению, довольно точные данные о заболеваемости можно получить путём тщательного обследования инфицированных токсоплазмозом лиц. Зная процент инфицированности населения соотношение латентных и манифестных форм токсоплазмоза, можно рассчитать частоту клинически выраженных форм токсоплазмоза на определенное число жителей.
Частота инфицированности изучена достаточно полно. Частота манифестных форм среди лиц с положительными результатами иммунологических реакций изучена недостаточно. Е. А. Шевкунова (1980), Е. А. Шевкунова и др. (1976) приводят данные обследования инфицированных в Московской области. Различные клинические проявления токсоплазмоза были выявлены у 44 % инфицированных. Имеются сообщения других авторов о том, что при тщательном клиническом обследовании инфицированных у многих удается находить те или иные проявления болезни.
По наблюдениям, манифестные формы токсоплазмоза среди инфицированных встречаются не так часто, как это отмечено в работах Е. А. Шевкуновой. При клиническом обследовании молодых мужчин, инфицированных токсоплазмозом, не резко выраженные проявления болезни обнаруживались редко (менее 1 % от общего числа обследованных). Ежегодно обследуется 400 – 600 женщин с подозрением на активную токсоплазмозную инфекцию, предварительно наблюдавшихся в женских консультациях. У них проявления болезни выявлялось несколько чаще, чем у мужчин (3 – 5 %). Многие лица имеют лишь микросимптоматику токсоплазмоза (периодический субфебрилитет, лимфаденопатия, миальгия и артральгия, не резко выраженная астенизия), но остаются практически здоровыми, и продолжают работать, не обращаясь за медицинской помощью. У многих больных клинически выраженный токсоплазмоз остается не выявленным. Они получают неадекватное лечение из-за постановки ошибочного диагноза. Работа по своевременному выявлению больных манифестными формами токсоплазмоза ведется еще недостаточно и требует определенных организационных мероприятий, прежде всего создания консультативных центров по токсоплазмозу в крупных городах.
По классификации Сиима (Siim , 1971) с учетом преобладающей органной патологии выделяется пять клинических форм: лимфонодулярная, генерализованная (экзантемная) , миокардическая, энцефалитическая, глазная. В других классификациях выделяют также кишечную (абдоминальную) и легочную формы острого токсоплазмоза.
Лимфонодулярная форма характеризуется поражением, в первую очередь, шейных, затылочных лимфоузлов,реже мезентериальных и паратрахеальных, подмышечных, паховых. Увеличение лимфоузлов обычно сопровождается лихорадкой,головной болью, болью в мышцах. Могут отмечаться - увеличение печени и селезенки, боли в животе. Поражение паратрахеальных лимфоузлов иногда обнаруживают случайно при рентгенологическом исследовании. Увеличенные лимфоузлы могут сохраняться долго, до нескольких месяцев и даже лет, постепенно уменьшаться и становиться плотнее. Длительно может держаться субфибрилитет. В период обострения болезни лимфоузлы вновь могут увеличиваться.
Генерализованная форма начинается остро, высокой температурой, ознобом, головной болью, миалгиями. Макулопапулезная сыпь обычно появляется на 3-4 день заболевания, покрывается все тело, кроме волосистой части головы, ладоней, подошв. Сыпь исчезает постепенно через 2 недели. Уже с первых дней выявляются симптомы энтерита, увеличение печени, селезенки, лимфоузлов, пневмония, затем миокардит, энцефалит. Эта наиболее тяжелая форма встречается обычно у детей и стариков и часто заканчивается летально.
Миокардитическая форма диагностируется при доминирующем в клинике заболевания поражении сердца. Симптомы миокардита могут быть и при других формах приобретенного токсоплазмоза. Клиническая картина токсоплазмозного миокардита существенно не отличается от миокардитов другой этиологии.
Энцефалитическая форма При остром токсоплазмозном энцефалите состояние больных очень тяжелое, высокая температура, сильная головная боль, рвота, нарушение сознания, судороги, галлюцинации. Острый энцефалит может развиваться на фоне генерализованной инфекции, а позднее доминирует в клинике заболевания. В процесс может быть вовлечен спинной мозг и мозговые оболочки.
Глазная форма приобретенного токсоплазмоза протекает по типу хориоретинита, гранулематозного увеита. Поражение глаз может быть единственным проявлением заболевания или сочетается с поражением ЦНС, сердца. Наиболее характерным является очаг воспаления в заднем отделе глаза по типу центрального хориоретинита. Поражение глаз носит хронический рецидивирующий характер, постепенно развиваются очаги пиг- ментной дегенерации, атрофия сетчатки, атрофия диска зрительного нерва, приводящие к прогрессирующему ухудшению зрения, слепоте.
Поражение легких при приобретенном токсоплазмозе обычно развивается в острой стадии заболевания, при генерализации инфекции. Существование изолированного поражения легких при токсоплазмозе не доказано.
Поражение кишечника в острой стадии протекает как энтерит – с болями в животе, снижением аппетита, поносом, рвотой, и обычно проходит под диагнозом энтерита неясной этиологии.
При обследовании беременных женщин доказательством приобретенной инфекции является сероконверсия или увеличение титров в 3-4 раза..
Не все дети, заразившиеся внутриутробно, имеют при рождении клинически выраженный токсоплазмоз, а только одна треть из них. В остальных случаях это асимптомные формы токсоплазменной инвазии, которые через месяцы и годы , как правило, дают поздние клинические проявления .
Степень выраженности клинических признаков зависит от времени заражения плода. Наиболее тяжелые поражения ЦНС и глаз наблюдаются при заражении матери в первом триместре беременности, а при заражении в третьем триместре у новорожденных преобладают асимптомные формы.
Природная очаговость
Возбудитель токсоплазмоза широко распространен среди теплокровных животных. Установлено, что в различных природно-климатических зонах токсоплазмы циркулируют среди большого количества видов животных. В настоящее время известно о возможности инфицирования токсоплазмами 137-145 видов птиц, представляющих шестнадцать отрядов, и 293 – 301 вида млекопитающих 12 отрядов [Засухин Д. Н. и др., 1980]. Открытие особой роли домашних кошек в распространении токсоплазмоза не изменила положения о природной очаговости этой инфекции, тем более что скоро было выявлено наличие окончательных хозяев среди диких представителей семейства кошачьих. В частности, M. Jewell и соавт. (1972) установили, что ооцисты могут выделять ягуарунди (Felis yagouaroundi) и ооцисты (Felis pardalis),а N. Miller и соавт. (1972) показали, что окончательными хозяевами могут быть также рыжая рысь (Felis rufus), пума (Felis concolor) и дальневосточный кот (Felis bengalensis). Эти животные могут поддерживать циркуляцию токсоплазм в природных очагах. Кроме того, имеются данные, что циркуляция токсоплазм отмечается даже там, где отсутствуют облигатные хозяева половых стадий паразита – представители семейства кошачьих [Рогатых Н. А. и др., 1977; Засухин Д. Н. и др., 1980]. В связи с этим нуждаются в дополнительном изучении многие вопросы эпизоотологии токсоплазмоза в природных очагах. Природные и антропургические очаги находятся в тесной связи. Природно-очаговый характер токсоплазмоза осложняет проблему снижения уровня заболеваемости, а тем более ликвидации этой инфекции.
Токсоплазмы обнаружены у 170 видов различных диких млекопитающих в природных очагах нашей страны токсоплазмы выделены у 45 видов животных. Паразит обнаружен у 13 видов птиц. Таким образом, токсоплазмозу свойственен феномен природной очаговости. Все виды домашних и сельскохозяйственных животных – собаки, кошки, крупный рогатый скот, овцы, козы, свиньи и другие – являются носителями токсоплазм. Источник возбудителя инвазии – больные животные. Наиболее интенсивно токсоплазмы выделяются во внешнюю среду с околоплодной жидкостью, плацентой, абортированными и мертворожденными плодами. В экскретах (молоко, слезы, слюна, моча и т. п.) токсоплазмы обнаруживаются только в острый период болезни.
Прямое или косвенное общение диких животных с домашними создает возможность передачи токсоплазм от одних другим, а также человеку. С целью определения резервуаров и источников инвазии проводят массовые серологические обследования домашних и диких животных. Кроме того, используют прямое микроскопирование и выделение токсоплазм. По данным Е. А. Шевкуновой, из 2233 обследованных сельскохозяйственных животных в различных областях нашей страны положительно реагировали на токсоплазмоз 20.4 %. Но Шевкунова и Засухин в серологическом исследовании на большом поголовье получили неодинаковые результаты что, по их мнению, свидетельствует о различной степени инвазированности животных.
Широкое распространение токсоплазм Ировец и Ира объясняют следующими причинами: широкой адаптацией паразита к различным животным, пантропизмом паразитов, выделением их во внешнюю среду со всеми секретами организма, многочисленными воротами проникновения паразита, относительной устойчивостью паразита к неблагоприятным условиям среды, повсеместным его распространением.
Обмен токсоплазмами между животными в природном очаге осуществляется, по мнению Галузо и Кравковой, через биоценотические контакты их компонентов: хищничество, каннибализм, укусы животными друг друга, поеданием загрязненных или зараженных продуктов питания.
Большинство исследователей отмечают, что крупный рогатый скот в естественных условиях чаще всего является носителем токсоплазм.
И. Г. Галузо, В. И. Голосов, З. И. Горбунова в 1963 году сообщили о том, что в отдельных пригородных хозяйствах г. Алма-Ата положительно реагировали на токсоплазмоз около 60 % овец. На территории Белоруссии, положительно реагирующие в РСК на токсоплазмоз выявлены среди 7 видов животных (В. Н. Скибо, 1969), причем наибольший процент положительно реагирующих установлен при исследовании сыворотки песцов (33.3 %) и собак (25 %).
Токсоплазмоз у животных протекает либо в скрытой (латентной) форме, либо в виде клинически выраженного острого переболевания. Иногда это заболевание протекает в виде эпизоотий, такие случаи описаны преимущественно в зарубежной литературе.
Исследователи США, Англии, Японии, Норвегии, Мексики и др. сообщают о тяжелом переболевании токсоплазмозом свиней, сопровождающемся большим отходом – особенно молодняка. Животные до 6-10 месяцев более восприимчивы и болеют тяжелее, чем взрослые.
В американском ветеринарном справочнике (1961) приведены итоги исследования крупного рогатого скота на токсоплазмоз. Установлено, что в некоторых стадах это заболевание является основной причиной смертности телят.
Некоторые авторы указывают, что наибольшая зараженность у свиней всех возрастных групп отмечена в весенне-летний период.
Алиментарный путь передачи токсоплазм – при употреблении корма и воды, загрязненных ооцистами токсоплазм, при поедании больных токсоплазмозом и их трупов, а иногда и молока больных животных.
Передача токсоплазм трансплацентарным путем (врожденный токсоплазмоз). О передаче токсоплазм этим путем у мышей сообщали Айхенвальд, Меллер, Беверли, Ремингтон и др. По мнению Ремингтона и др., частота передачи токсоплазм плоду через плаценту зависит от штамма паразита: по их данным, штамм Беверли вызывает врожденный токсоплазмоз чаще, чем штамм RH. В опытах доказана возможность трансплацентарной передачи токсоплазм у крупного и мелкого рогатого скота и других животных, а также человека. Кестнер и Коул установили характерные патологические изменения в мозгу у двух из трех телят, родившихся от экспериментально зараженных животных, однако токсоплазм выделить от них не удалось. Беверли и Уотсон исследовали 39 абортированных плодов от овец. Токсоплазм им удалось выделить у 6 животных. Выделенные штаммы имели пониженную вирулентность.
У свиней при экспериментальном заражении маток передачу токсоплазм плодам впервые наблюдал Беккер. Однако автору у животных, убитых во время второй беременности, токсоплазм выделить не удалось. О выделении токсоплазм у поросят от двух спонтанно больных токсоплазмозом свиноматок сообщали Сангер и Коул.
Вренер и др. изучали пути возможного инфицирования при врожденном токсоплазмозе крыс и мышей. Как было установлено авторами, в эндометрии зараженных мышей наблюдались воспалительные очаги двух типов: скопление токсоплазм со слабо выраженной клеточной инфильтрацией и некроз токсоплазмозного очага. В связи с тем, что трофобластические клетки принимают участие в образовании ворсинок, токсоплазмы оказываются внутри них. В дальнейшем токсоплазмы размножаются в мезенхимальных клетках ворсинок. И только после образования кровеносных сосудов паразит может проникать в кровеносную систему плода. Токсоплазмы могут также находиться и в клетках децидуальной оболочки.
Однако следует учесть, что плацентарная связь у млекопитающих неодинакова, поэтому неудивительно наличие в литературе зачастую противоречивых данных о врожденном токсоплазмозе у сельскохозяйственных животных.
В естественных условиях заражение чаще всего происходит алиментарным путем.
Токсоплазмоз кошек
Кошка, «обойденное» наукой животное. Ученые мало изучают болезни кошек и их паразитов. Но кошки должны быть «в обиде» особенно на эпидемиологов и эпизоотологов, так как ни те, ни другие не обращают на них должного внимания при анализе эпидемиологической и эпизоотологической ситуации заразных болезней. Собак, по настоянию специалистов регистрируют, прививают, дегельминтизируют, держат на цепи, а кошка живет спокойно. Спит она часто под одним одеялом с хозяйкой, бывает, что ест из одной посуды с детьми, ее целуют и ласкают.
Ночью же кошка выполняет свою биологическую функцию – она ловит мышей, обычно разрывает свою добычу в комнате или на кухне и остатки разносит по всей квартире. В сельской местности, на дачах кошки выходят на охоту в поле. Там они добывают мышевидных грызунов, нападают на маленьких сусликов, хомячков, песчанок, ловят воробьев и других птиц, и , что особенно важно, кошка не уничтожает свою добычу на месте, а приносит ее в дом. Кошка является очень активным каналом проникновения заразного начала от диких животных к человеку. Так как только кошачьи являются окончательными хозяевами токсоплазм, то они являются источником заражения человека.
Первые случаи токсоплазмоза кошек описаны в США (Olafson и Monlux, 1942; Holzworth, 1954; Lieberman, 1954; Gibson, и Eyles, 1957; Jones, Eyles и Gibson, 1957), один в Канаде (Hulland, 1956), один в Австрии (Wicham и Carne, 1950), описаны случаи в Голландии (Verlind, 1950), Норвегии (Borlen, 1956), Японии (Jzmamoto, 1955) и других стран.
Особенно интересны сообщения Гибсон и Эйлс из США, которые обнаруживали инфицированных кошек, живущих в непосредственной близости с семьей, несколько членов которой болели токсоплазмозом; Боргет (1956) нашел зараженную токсоплазмозом кошку в доме, где был случай врожденного токсоплазмоза. Джонс и Эйлс (1957) в Южной Каролине (США) обследовали 140 кошек и у 34 из них (24,3%) путем биопробы на белых мышах выявили токсоплазмы. Они же выделили токсоплазм у 22 кошек из 102 обследованных в г. Мемфис и у 2 из 9 обследованных в сельской местности. Характерно, что все исследованные ими кошки были клинически здоровы. Интересно отметить и то, что плоды беременных кошек были также свободны от токсоплазм, хотя у 2 маток они были выделены, 4 – дали положительные серологические реакции с красителями.
В 1967 году Хатчисоном было установлено, что токсоплазмы у экспериментально зараженных кошек выделяются с яйцами Toxocara cati, в которые они проникают. В таком виде паразиты могут жить длительное время во внешней среде, защищаясь от неблагоприятных влияний оболочкой яиц.
В опытах Шеффилда и Мелтона было установлено, что инкубирование при комнатной температуре от 3 до 14 дней кала, взятого на 4-8 день от кошек, зараженных T. gondii и свободных от яиц T. cati, с последующим инокулированием его мышам приводило к развитию у них токсоплазмоза. По данным Фроенкеля и др., инфективность кала наблюдалась в период от 5 до 18 дня, а по данным Уорка и Хатчисона – в первые 12 дней. Методика обработки кала во всех описанных исследованиях была одинаковой. Собранный кал фильтровали и обрабатывали насыщенным раствором поваренной соли и 33 %-ным раствором сернокислого цинка. Взятый с поверхности жидкости материал отмывали повторно и помещали в водопроводную воду на 3 недели при комнатной температуре.
Необходимо отметить, что с 1969 года все исследователи проводят опыты на кошках, свободных с момента рождения от паразитов (животные выращены в специальных условиях).
А.Н. Воличев и В.В. Горохов (1999) сообщают, что в Москве бездомные и дикие кошки инвазированы токсоплазмами от 30 до 62 %.
По данным некоторых авторов в США 30 % кошек инвазированы, 1 % кошек экскретирует ооцисты. Интересно, что у кошек есть свой вирус иммунодефицита, и кошки, пораженные им, в 50 % случаев дают положительные реакции на токсоплазмоз.
На основании результатов своих работ авторы предлагают отнести токсоплазм к классу Toxoplasmea подтипа Sporozoa. Шизогония и гаметогония, наблюдаемые у токсоплазм, идентичны этим же формам у кокцидий, что дает право отнести токсоплазм к подотряду Eimeriina. Далее авторы считают, что токсоплазмоз как заболевание должен быть отнесен к кокцидиозам.
Таким образом, токсоплазмы могут быть охарактеризованы как кишечные кокцидии кошек с орально фекальным путем передачи. Формирование переживающих цист в мозгу и мышцах делает возможной передачу простейшего при хищничестве. Заражение происходит либо ооцистами, либо цистами; другие млекопитающие и птицы могут расцениваться как промежуточные хозяева.
Источники инфекции для человека
Многие дикие млекопитающие и птицы могут инфицироваться токсоплазмами и являться для человека потенциальными источниками инфекции. Например, при обследовании животных в зоопарках ГДР токсоплазмозная инфекция выявлена у 89 видов млекопитающих и 105 видов птиц [Ippen R.et al.,1981] . Однако значение диких животных в инфицировании человека невелико. Чаще они могут служить источниками инфекции для домашних плотоядных животных (кошек). Возможность заражения человека может возникнуть при употреблении недостаточно термически обработанного мяса диких животных, являющихся объектами охоты (кабаны, зайцы, олени и др.). Инфицирование также может произойти ооцистами, выделенными дикими животными семейства кошачьих. Мы наблюдали инфицированную женщину, длительное время работающую в зоопарке в отделе хищников семейства кошачьих, где были рыси, пума, бенгальский кот и др. Описана также вспышка токсоплазмоза среди американских военнослужащих, находившихся в джунглях; заражение наступило после употребления воды, загрязненной дикими представителями семейства кошачьих [Benenson M. Et al., 1981]. Однако эти случаи следует рассматривать как казуистические.
Основным источником инфекции для человека являются домашние и сельскохозяйственные животные. Особое внимание привлекали собаки и кошки, с которыми человек часто находится в тесном и постоянном контакте.
Собаки часто бывают инфицированы токсоплазмозом. У них инфекция может протекать не только латентно, но и в виде манифестных острых и хронических форм. Е. А. Шевкунова (1980) приводит данные о частоте токсоплазмоза у собак. Инфицированность их колеблется от 9 – 70 %. Некоторые авторы отмечают и более частое инфицирование. Например, в Западном Берлине инфицировано 87 % собак [Janitschke K., 1971]. Таким образом, широкое распространение токсоплазмоза у собак не вызывает сомнения. Вероятно, это послужило для ряда сообщений о возможности заражения человека от собак [Ковалева Е. П., 1966; Ковалева Е. П., Лавочкин В. М., 1973; Westphal A., Finke L., 1950, и др.], однако эти работы не содержат убедительных доказательств.
Рассмотрим, какова вероятность инфицирования от собак. Установлено, что токсоплазмы в выделениях экспериментально зараженных собак (слюна, слезы, моча) или не обнаруживались, или обнаруживались очень редко, а при естественной инфекции токсоплазм у собак не находили [Jenitschke K., 1971]. Кроме того, эндозоиты, если они иногда и выделяются, во внешней среде быстро погибают и не могут обусловить инфицирования. Цисты находятся в тканях и во внешнюю среду не выделяются, ооцист в организме собак не образуется. Учитывая эти данные и то, что мясо собак в пищу не употребляется, И. Г. Галузо (1974) считает собак «тупиком» токсоплазмозной инфекции. Очень убедительные результаты получили D. Kuhn и соавт. (1972). Они заражали собак ооцистами токсоплазм и назначали животным иммунодепрессанты, чтобы получить острую генерализованную инфекцию. И даже при этих условиях авторам не удалось обнаружить токсоплазмы в кале или других выделениях. Не было обнаружено различий в частоте инфицированности токсоплазмозом в семьях, имеющих собак и не содержащих этих животных [Peterson D. et al., 1972]. Е. А. Шевкунова (1980) при обследовании 2663 человек также не выявила различий в уровне зараженности людей, содержащих и не содержащих собак. Все эти данные убедительно показывают, что собаки не играют какой-либо роли в качестве источника заражения людей токсоплазмозом. В ещё большей степени это положение относится к другим представителям семейства псовых, которые содержатся на зверофермах (лисы, писцы).
Домашние кошки занимают особое положение в эпидемиологии токсоплазмоза, поскольку они являются основными окончательными (облигатными) хозяевами в антропургических очагах. Сведение об инфицированности кошек неодинаковы; возможно, это зависит от разных подходов к изучению вопроса. По данным А. В. Левит (1976), инфицировано от 21.9 до 43.6 % кошек. В Японии инфицировано 60.2 % кошек [Iseki M. Et al., 1974], в Дании – 62.2 %[Work K., 1969], а по данным D. Kuhn и соавт. (1973), инфицировано даже 81 % кошек, хотя лишь 1.4 % из них выделяли ооцисты с испражнениями. Исследования показали, что бездомные кошки инфицированы чаще, чем домашние [Swanepoel R. Et al., 1974; McColm A. Et al., 1981].
При первичном экспериментальном инфицировании неиммунных кошек ооцисты в кале появлялись уже на 3 – 4 день после заражения и выделяются до 15 – 16 –го дня; кошек с высоким уровнем антител заразить не удается [Piekarski G., Witte H., 1972]. В естественных условиях после поедания кошками зараженных мышей, крыс, птиц, сырого мяса, содержащего цисты токсоплазм, ооцисты в кале появляются уже через 3 – 5 дней после заражения, а после инфицирования ооцистами – через 20 – 34 дня, причем в обоих случаях выделение ооцист инфицированными кошками продолжается 1 – 2 недели после первичного заражения; после повторного заражения ооцисты не выделяются или обнаруживаются в течение очень короткого периода времени. Максимальное количество ооцист в фекалиях при первичном заражении колеблется от 1000 до 1000 000 [Frenkel J., Dubey G., 1973]. Таким образом, наибольшую эпидемиологическую значимость представляет первичное инфицирование кошек. Обычно оно наступает у котят, начавших охотиться самостоятельно, или есть сырое мясо [Ruiz A., Frenkel J., 1980]. Созревают ооцисты после 3 – 7 дней пребывания во влажной теплой среде [Metz H., 1973]. Они попадают в почву, где сохраняются до 1½ лет, причем дождевые черви могут диссеминировать ооцисты [Frenkel J. et al., 1975]. Ооцисты обнаруживаются также в воде [Benenson M. et al., 1982]. Однако, несмотря на короткий период выделения ооцист, роль кошек как источника инфекции велика, что связано с длительным сохранением ооцист. Так, на острове Новая Гвинея, в деревнях, где нет кошек, инфицировано всего 2 % населения, а в деревнях, где много кошек, инфицированность достигает 14 – 34 % [Wallace G. et al., 1974]. Имеет значение и содержание кошек в доме. По данным D. Peterson и соавт. (1972), при наличии кошек в семье инфицировано 20.9 %, а при отсутствии кошек – лишь 9.3 % обследованных людей. Повышенную зараженность лиц, содержащих кошек, подтверждают и другие авторы [Е. А. Шевкунова и др., 1976; Jira J. et al., 1975; Frenkel J., Ruiz A., 1980].
Кошки нередко загрязняют фекалиями песок на детских площадках. Почву на приусадебных и содовых участках. Заражение людей ооцистами происходит при несоблюдении правил гигиены (употребление немытых овощей, садовой земляники, загрязнение пищевых продуктов немытыми после работы с почвой руками и т. п.). Высказывались предположения о возможности передачи ооцист воздушно-пулевым путём [Teutsch S. et al., 1979], но убедительных доказательств возможности передачи не проводилось.
Сельскохозяйственные животные (свиньи, овцы, козы, крупный рогатый скот и др.) являются промежуточными хозяевами паразита в антропургических очагах и не выделяют во внешнюю среду цистных форм токсоплазм, однако именно эти животные играют основную роль в инфицировании людей. Контакт с животными не имеет существенного эпидемиологического значения. Ветеринарные работники инфицируются с такой же частотой, как и здоровые доноры [Swanepoel R. et al., 1974]. Сельскохозяйственные животные заражаются, поедая фураж, загрязненный фекалиями кошек, выделяющие ооцисты. По данным Е. А. Шевкуновой и др. (1961), в СССР инфицированность крупного рогатого скота колеблется в разных регионах от 16.5 % до 32.9 %, овец – от 20 до 27.5 %, свиней – от 29 до 21 %, лошадей – от 17 до 33.3 %. В среднем было заражено 20 % всех обследованных животных. В других странах инфицированность сельскохозяйственных животных оказалась еще выше. В Западном Берлине, по данным серологических обследований, было инфицировано 86 % свиней и 88 % овец, токсоплазмы найдены в 12 % проб мыса этих животных. Как видно из приведенных данных, наибольший риск представляет свиное мясо. Более высокая зараженность свиней вполне объяснима, если учитывать их всеядность, алиментарные связи с домовыми грызунами.
По мнению Комитета экспертов ВОЗ (Серия технических докладов 638, Женева, 1980), передача токсоплазм у человека происходит почти исключительно алиментарным путем в результате употребления мяса, содержащего цисты или токсоплазмы, либо мяса, зараженного ооцистами. Можно полностью согласиться с А. Я. Лысенко (1980), который считает, что с эпидемиологической точки зрения токсоплазмоз является зоонозом сельскохозяйственных и домашних животных, наиболее частым фактором передачи возбудителя человеку является мясо инвазированных сельскохозяйственных животных. «Гео-оральный» механизм передачи инфекции человеку реализуется реже. Таким образом, практическое значение имеет возможность заразиться при употреблении сырого или недостаточно прогретого мяса, реже – ооцистами от кошек.
 
Список литературы

1. Акиншина Г. Т., Быковский А. Ф. Субмикроскопическое строение Toxoplasma gondii // Зоологический журнал. –1964.-№9.
2. Акиншина Г.Т., Засухин Д. Н. Новые данные о возбудителе токсоплазмоза // Актуальные проблемы токсоплазмоза. –М., 1972.
3. Бугаев А.М. Вопросы патоморфологии и патогенеза при экспериментальном токсоплазмозе плотоядных: Алма-Ата ,1980
4. Виноградова Л.И. Домашние и синантропные животные, как источники токсоплазмозной инвазии в Карельской АССР. - Петрозаводск ,1970.
5. Вопросы природной очаговости болезней.– Новосибирск, 1992.
6. Вопросы природной очаговости болезней. - Алма-Ата, 1966.
7. Вопросы природной очаговости болезней. - Алма-Ата,1983.
8. Всесоюзная конференция по природной очаговости болезней. - Новосибирск, 1989.
9. Грачёва Л. И., Гончаров Д. Б. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение токсоплазмоза.- Методические рекомендации М.- 1996.- 16 с.
10. Диагностика токсоплазмоза (сборник статей). Под редакцией профессора Д.Н. Засухина М., "Медицина", 1966.
11. Егошина А.А. Материалы по токсоплазмозу животных и человека в Киргизии - Автореф., Алма-Ата, 1971, 24с.
12. Жизненный цикл токсоплазм под ред. И.Г. Галузо, Алма-Ата, "Наука", 1974.
13. Засухин Д.Н., Грачёва Л.Н. и Дунаева З.В. Токсоплазмоз у кошек // Токсоплазмоз.- М., 1958.
14. Засухин Д.Н., Иыжете А.Л. Токсоплазмоз.- М., 1965.
15. Казанцев А.П. Токсоплазмоз. – Л.: "Медицина", 1985.
16. Ковалева Е.П. Токсоплазмоз (эпидемиология и профилактика). – М., 1967.
17. Колесов А.А. Имуннологическое изучение токсоплазмоза у животных и человека: Автореф., М., 1979., 30с.
18. Крылов М.В. Возбудители протозойных болезней домашних животных и человека: в 2 т., Российская Академия Наук Зоологический Институт. – Санкт-Петербург, 1994.
19. Литвиненко В.И. Сравнительная оценка некоторых методов лабораторной диагностики токсоплазмоза: Автореф., Днепропетровск, 1967., 21с.
20. Левит А.В. Некоторые итоги обследования на токсоплазмоз домашних животных в Алма-Атинской области. // Паразиты сельскохозяйственных животных Казахстана. – Алма-Ата, 1962.
21. Методики исследований при протозойных заболеваниях животных, М., 1971
22. Никитин В.В. О распространении и клинике токсоплазмоза в Алтайском крае: Автореф., г. Иваново, 1971, 16с.
23. Новинская В.Ф. Токсоплазмоз хищных млекопитающих Казахстана: Автореф., М., 1972., 23с.
24. Нугуманова М.Ф. Методы паразитологической диагностики токсоплазмоза: Автореф., Казань, 1975, 29с.
25. Паразиты сельскохозяйственных животных Казахстана. – Алма-Ата, 1962.
26. Паразиты диких животных Казахстана. - Алма-Ата, 1963.
27. Паразиты и паразитозы человека и животных. - Киев, 1965.
28. Природноочаговые болезни и вопросы паразитологии. – Фрунзе, 1964.
29. Природноочаговые болезни человека: Респ. Сб. науч. Тр. – Омск, 1988.
30. Природноочаговые болезни. –Омск, 1989.
31. Смайкина М.Г. Токсоплазмоз. –М., 1966.
32. Современное состояние и проблемы токсоплазмоза, Новосибирск, 1988., (сборник статей).
33. Степанова Н.И., Смайкина М.Г. Токсоплазмоз животных и человека. –М., 1970.
34. Сыргабаева З.Р. Лабораторная диагностика токсоплазмоза у людей. – Алма-Ата, "Казахстан", 1974
35. Тимофеев Б.А. Токсоплазмоз сельскохозяйственных животных. –М., 1971.
36. Токсоплазмоз животных и человека. – М., "Россельхозиздат", 1967.
37. Токсоплазмоз человека. Под ред. Пап А.Г., Засухина Д.Н. –М., 1974.
38. Токсоплазмиды. - Л., "Наука", 1979, (сборник статей).
39. Токсоплазмоз: продолжение дискуссии и перспективы научных исследований. - М., 1990 (сборник статей).
40. Чеботарёв Р.С. Справочник по ветеринарной и медицинской паразитологии. –Минск, 1971.
41. Шевкунова Е.А. Токсоплазмоз людей и животных в некоторых районах СССР: Автореф., М., 1966, 18с.
42. Шеремет О.П. Диагностическое значение РСК и аллергической внутрикожной пробы при токсоплазмозе.- Киев, 1966.
43. Яковлев А.А. …О факторах, влияющих на распространённость токсоплазмоза. – Владивосток, 1985